海南上溪省級自然保護區于1981年經(jīng)原海南行政區公署（[1981]151號）文批準成立，1990年經(jīng)原萬(wàn)寧縣人民政府劃界確權。保護區位于萬(wàn)寧市西南部，東經(jīng)110°02′29″～110°14′17″，北緯18°45′36″～19°00′49″，分布在萬(wàn)寧市三更羅鎮、長(cháng)豐鎮及興隆華僑農場(chǎng)、新中農場(chǎng)行政區域內，其東鄰本市長(cháng)豐鎮；西與瓊中縣交界；南至南林省級自然保護區；北至瓊海市牛路嶺水庫和海南尖嶺省自然保護區，總面積11663hm2。
保護區總體屬于低山—高丘陵地貌。區內最高海拔山峰為900米，其余山峰海拔一般在350米—700米之間，為海南島森林生態(tài)系統類(lèi)型自然保護區中的低海拔類(lèi)型，區內保存了為數不多的熱帶低地雨林和季雨林樹(shù)種。
保護區的土壤類(lèi)型主要為磚紅壤。土層深厚，大多數厚于80厘米，土壤顯酸性至微酸性。土壤自然植被主要為低地次生雨林、灌叢和草坡。
保護區屬于熱帶海洋季風(fēng)氣候，干濕季節分明，5-10月為雨季，11月—次年4月為旱季。區內年平均氣溫25℃左右，年均降雨量為2077.4毫米，年均蒸發(fā)量為1770毫米，年平均相對濕度77％，臺風(fēng)、暴雨、干旱、低溫陰雨等是保護區的主要災害性天氣。
保護區植被分為熱帶山地雨林、熱帶濕潤雨林、熱帶次生林、灌叢和人工林等5個(gè)植被類(lèi)型。區內有野生種子植物151科619屬1178種（含變種、亞種及變型），其中裸子植物6科、7屬、13種，雙子葉植物124科、507屬、986種，單子葉植物21科、105屬、179種。有22種被列入《國家重點(diǎn)保護植物名錄》。其中國家I級保護植物——海南蘇鐵在局部地區可形成優(yōu)勢種。
保護區大體可分為熱帶溝谷雨林動(dòng)物群、熱帶山地雨林動(dòng)物群、山地次生灌木草坡動(dòng)物群、農田動(dòng)物群等4個(gè)動(dòng)物群。根據文獻記載和近年來(lái)的調查，上溪地區記錄的陸棲脊椎動(dòng)物有27目76科232種。其中兩棲綱2目6科22種，爬行綱3目11科39種，鳥(niǎo)綱14目38科128種，哺乳綱8目21科43種。
保護區管理機構為海南上溪省級自然保護區管理站,屬納入省財政撥款的正科級事業(yè)管理單位,下設新中、香根、石福、大洲等4個(gè)護林分站。